Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch hấp thu enzym liên kết - trong tiếng Anh Enzyme-Linked Immuno Assay - hay xét nghiệm ELISA là một xét nghiệm miễn dịch học cho phép phát hiện hoặc xét nghiệm các phân tử trong mẫu sinh học. Nó được lên ý tưởng và phát triển bởi hai nhà khoa học Thụy Điển, Peter Perlmann và Eva Engvall tại Đại học Stockholm vào năm 1971.

Các phân tử được xét nghiệm bằng phương pháp ELISA nói chung là protein. Và các loại mẫu bao gồm vật liệu sinh học dạng lỏng - huyết tương, huyết thanh, nước tiểu, mồ hôi -, môi trường nuôi cấy tế bào hoặc protein tái tổ hợp - protein được tạo ra bởi tế bào có vật liệu di truyền đã bị thay đổi do tái tổ hợp di truyền - được tinh chế thành dung dịch.

Xét nghiệm ELISA chủ yếu được sử dụng trong miễn dịch học để phát hiện và / hoặc đo lường sự hiện diện của protein, kháng thể hoặc kháng nguyên trong mẫu. Xét nghiệm huyết thanh học này đặc biệt phát hiện các kháng thể do cơ thể tạo ra để đáp ứng với sự nhiễm vi rút.

Việc sử dụng các kháng thể để chẩn đoán các bệnh truyền nhiễm là một phương pháp cụ thể và nhanh chóng. Kỹ thuật ELISA là một kỹ thuật miễn dịch-enzym giúp có thể hình dung, từ một mẫu sinh học, các phản ứng giữa kháng nguyên - cơ thể được sinh vật sống coi là ngoại lai - và kháng thể bằng cách sử dụng phản ứng màu được tạo ra bởi dấu hiệu enzym - nói chung là phosphatase kiềm và peroxidase - trước đó đã được gắn vào kháng thể. Phản ứng màu xác nhận việc xác định vi khuẩn được phân lập hoặc sự hiện diện của vi rút mong muốn và cường độ của màu sắc cho biết số lượng kháng nguyên hoặc kháng thể trong mẫu đã cho.

Có bốn loại bài kiểm tra ELISA chính:

• ELISA trực tiếp, giúp phát hiện hoặc đo lường kháng thể. Nó chỉ sử dụng một kháng thể chính;
• ELISA gián tiếp, được sử dụng rộng rãi nhất, cũng giúp phát hiện hoặc xét nghiệm kháng thể. Nó sử dụng một kháng thể thứ cấp giúp nó có độ nhạy tốt hơn so với ELISA trực tiếp;
• ELISA trong cuộc thi, cho phép liều lượng của kháng nguyên. Được tạo ra bởi sự cạnh tranh về liên kết, nó không sử dụng một loại enzyme;
• ELISA «trong bánh sandwich», cho phép liều lượng của kháng nguyên. Kỹ thuật này được sử dụng phổ biến trong nghiên cứu.

Bài kiểm tra ELISA được sử dụng cho:

• Tìm và đo các kháng thể trong huyết thanh học để chẩn đoán các bệnh truyền nhiễm: virus học, ký sinh trùng, vi khuẩn học, v.v ...;
• Liều lượng protein ở nồng độ thấp: liều lượng cụ thể của một số protein huyết tương (immunoglobulin E (IgE), ferritin, hormone protein, v.v.), chất chỉ điểm khối u, v.v.;
• Liều lượng phân tử nhỏ: hormone steroid, hormone tuyến giáp, thuốc…

Xét nghiệm ELISA đặc biệt được sử dụng để chẩn đoán nhiều bệnh truyền nhiễm:

Các bệnh lây truyền qua đường tình dục (STDs)

Bao gồm viêm gan, giang mai, chlamydia và HIV. Được các cơ quan y tế khuyến cáo, đây là xét nghiệm sàng lọc AIDS chính: nó cho thấy sự hiện diện của kháng thể chống HIV và kháng nguyên p24 sáu tuần sau khi nhiễm bệnh.

Các bệnh khu vực hoặc vùng lưu hành

Bệnh sốt vàng da, bệnh do vi rút Marburg (MVM), bệnh Ladengue, bệnh Lyme, bệnh Chikungunya, bệnh sốt Rift Valley, bệnh Ebola, bệnh sốt Lassa, v.v.

Covid-19

Được thực hiện hơn 2 đến 3 tuần sau khi xuất hiện các triệu chứng, xét nghiệm ELISA giúp xác định sự hiện diện của các kháng thể chống SARS-CoV-2 trong vòng chưa đầy một giờ.

Vi rút gây bệnh nhiễm trùng trước khi sinh

Ví dụ: nhiễm Toxoplasmosis, rubella, cytomegalovirus, herpes simplex.

Các trường hợp khác

Nhưng anh ấy cũng đã tìm thấy các ứng dụng trong việc phát hiện:

• Mang thai;
• Bệnh tự miễn;
• Các chất gây dị ứng thực phẩm: việc xác định định lượng tổng số globulin miễn dịch E (IgE) giúp đánh giá và điều trị dị ứng;
• Rối loạn nội tiết tố;
• Dấu ấn khối u;
• Virus thực vật;
• Và nhiều cái khác

Là một phần của việc phát hiện kháng thể chống SARS-CoV-2, một nghiên cứu thử nghiệm được thực hiện vào tháng 2020 năm 2 bởi Viện Pasteur, CNRS, Inserm và Đại học Paris đã xác nhận độ tin cậy của xét nghiệm ELISA: cả hai xét nghiệm ELISA đều được kiểm tra sử dụng toàn bộ protein N của SARS-CoV-90 (ELISA N) hoặc vùng ngoại bào của vi rút tăng đột biến (S) làm kháng nguyên đích. Kỹ thuật này có thể giúp xác định kháng thể trong hơn 1% trường hợp, với tỷ lệ dương tính giả rất thấp là XNUMX%.

Được thực hiện tại các phòng thí nghiệm phân tích theo đơn thuốc, các xét nghiệm Elisa có giá khoảng 10 euro và được Bảo hiểm Y tế hoàn trả 100%.

Được thực hiện tại các trung tâm thông tin, sàng lọc và chẩn đoán miễn phí (CeGIDD), họ có thể được miễn phí đối với HIV và SARS-CoV-2.